摘要:

采用(yong)Hep-2細胞分(fen)離培養(yang)水(shui)(shui)(shui)中的(de)(de)腸(chang)道(dao)(dao)病毒(du)(du)(du),根據腸(chang)道(dao)(dao)病毒(du)(du)(du)5'-UTR核(he)酸的(de)(de)保守區,建立了(le)一(yi)種(zhong)細胞培養(yang)與實時熒光定(ding)量PCR(ICC-RT-qPCR)聯合檢(jian)測感(gan)染(ran)(ran)性(xing)腸(chang)道(dao)(dao)病毒(du)(du)(du)的(de)(de)方法(fa)(fa)(fa)。對RT-qPCR、TCID50和(he)ICC-RT-qPCR3種(zhong)檢(jian)測方法(fa)(fa)(fa)進行靈(ling)敏度、相關(guan)(guan)性(xing)分(fen)析(xi),評價RT-qPCR、ICC-RT-qPCR用(yong)于(yu)估計(ji)水(shui)(shui)(shui)中感(gan)染(ran)(ran)性(xing)病毒(du)(du)(du)含(han)量的(de)(de)可(ke)行性(xing)。結果表明(ming),RT-qPCR方法(fa)(fa)(fa)高(gao)估了(le)水(shui)(shui)(shui)中病毒(du)(du)(du)的(de)(de)感(gan)染(ran)(ran)性(xing)。腸(chang)道(dao)(dao)病毒(du)(du)(du)低濃度(4.4×10-1~4.4×103TCID50/mL)時TCID50與ICC-RT-qPCR線性(xing)關(guan)(guan)系良好(hao),相關(guan)(guan)系數(shu)R2=0.99。水(shui)(shui)(shui)樣經濃縮(suo),ICC-RT-qPCR檢(jian)測病毒(du)(du)(du)含(han)量為1.0×103~3.2×104copies/L,估計(ji)含(han)量為3~30TCID50/L,與病毒(du)(du)(du)感(gan)染(ran)(ran)性(xing)11~29TCID50/L結果相近,檢(jian)出率為83.3%。高(gao)于(yu)TCID50的(de)(de)檢(jian)測結果(33.3%)。因此,ICC-RT-qPCR方法(fa)(fa)(fa)快速(su)、靈(ling)敏,可(ke)對水(shui)(shui)(shui)中感(gan)染(ran)(ran)性(xing)腸(chang)道(dao)(dao)病毒(du)(du)(du)進行準確(que)的(de)(de)定(ding)量分(fen)析(xi)。

  使用微信“掃一掃”功能添加“谷騰環保網”

相關文章