細(xi)菌生長迅速，繁殖周期短，運轉費用低，它們(men)(men)在海(hai)(hai)(hai)洋(yang)(yang)中的(de)廣泛分布和對水(shui)體環境起著(zhu)較(jiao)大影響(xiang)因而廣受(shou)國內(nei)外海(hai)(hai)(hai)洋(yang)(yang)學(xue)家們(men)(men)的(de)重(zhong)視[1，2]。近年來的(de)研究工作主(zhu)要針對海(hai)(hai)(hai)洋(yang)(yang)細(xi)菌學(xue)的(de)分布、豐度、種類組(zu)成以及(ji)生理生化特點[3-5]。但是，有關細(xi)菌作為海(hai)(hai)(hai)洋(yang)(yang)環境監測指(zhi)標方面的(de)報道還很(hen)少(shao)，需要進一步開展研究。

本論文以天津渤海(hai)(hai)灣(wan)的(de)3個入(ru)海(hai)(hai)河口(kou)(kou)為調查研究對象(xiang)，實驗采(cai)樣位點設在大港渤海(hai)(hai)灣(wan)的(de)青靜黃排水河入(ru)海(hai)(hai)口(kou)(kou)、獨流減(jian)河入(ru)海(hai)(hai)口(kou)(kou)和塘(tang)沽渤海(hai)(hai)灣(wan)的(de)海(hai)(hai)河入(ru)海(hai)(hai)口(kou)(kou)。在不同(tong)季節進(jin)行(xing)了(le)表(biao)層水現場取(qu)樣和分析，建立(li)了(le)用細(xi)菌指(zhi)標作為海(hai)(hai)洋環境監測(ce)的(de)方法，并對水樣中理化指(zhi)標與(yu)細(xi)菌指(zhi)標的(de)污(wu)染(ran)評價結果及其(qi)相(xiang)關性進(jin)行(xing)了(le)比較與(yu)分析。

1 材料與方法

1.1 樣品處理

采(cai)用多點混合(he)采(cai)樣(yang)(yang)的(de)格局，用無菌瓶直(zhi)接采(cai)集(ji)水下50 mm的(de)水樣(yang)(yang)放入冷藏箱，盡快帶(dai)回實驗室完成微生物操作。水質分(fen)析(xi)采(cai)樣(yang)(yang)依據《海(hai)洋監測規范》（GB 17378.4－1998）標(biao)準執行。樣(yang)(yang)品(pin)采(cai)集(ji)后迅速拿到實驗室進行分(fen)析(xi)測試。

1.2 方(fang)  法

對(dui)水(shui)(shui)樣測(ce)定的項(xiang)目有(you)細菌指標(biao)(biao)，如異養菌數(shu)、大腸(chang)菌群(qun)、弧菌數(shu)和(he)石(shi)油降(jiang)解菌。理(li)化指標(biao)(biao)，如溫(wen)度(du)、鹽(yan)度(du)、pH、DO、COD、硝(xiao)酸氮(dan)、亞硝(xiao)酸氮(dan)和(he)氨氮(dan)。測(ce)定方(fang)法(fa)均按(an)《海洋監測(ce)規范》執(zhi)行，海水(shui)(shui)評價標(biao)(biao)準參考《海水(shui)(shui)水(shui)(shui)質標(biao)(biao)準》[6，7]。

2 結果與討論

3次采樣的各項指標的檢測結果見表1、表2、表3。

2.1  理化指標評價水(shui)質(zhi)

根據國家海洋水質評價標準，此3個河口的理化指標如COD、無機氮等多超過國家四類水質標準（COD<5 mg/L，無機氮<0.5 mg/L），其中青靜黃排水河污染較為嚴重，其次是獨流減河，海河污染相對較輕。比較3次采樣結果，對于青靜黃排水河，第2次采樣時因施工已截流，樣品中混有一定比例的地下水，理化檢測指標（DO、COD）顯示水質好于第1次采樣，但無機氮含量明顯增加，富營養化程度趨于嚴重；獨流減河中無機氮含量變化較大，第2次采集的水樣無機氮含量最大（無機氮>1.2 mg/L），到第3次采樣時，無機氮含量降到國家水質三類標準（無機氮<0.4 mg/L）；海河閘前后水體中無機氮含量和COD變化較大，閘后面的水質要明顯好于閘前面的水質。

2.2  細菌作為監測指標對(dui)水(shui)質污(wu)染(ran)情(qing)況的(de)評(ping)價

2.2.1  異養菌數

異養菌數是(shi)最常用來(lai)指(zhi)示(shi)有(you)機(ji)(ji)污(wu)(wu)(wu)染(ran)的一個指(zhi)標。異養細菌能(neng)有(you)效利用陸源溶解有(you)機(ji)(ji)污(wu)(wu)(wu)染(ran)，對凈化海(hai)(hai)水(shui)(shui)(shui)化學環境、維(wei)持生態系統穩定性有(you)重要作用。異養細菌代(dai)表海(hai)(hai)域受有(you)機(ji)(ji)污(wu)(wu)(wu)染(ran)程度(du)(du)(du)，菌數與有(you)機(ji)(ji)物濃度(du)(du)(du)呈正(zheng)相關[8，9]。根據吉田提出的標準(zhun)污(wu)(wu)(wu)水(shui)(shui)(shui)區(qu)菌數在(zai)105以上以及水(shui)(shui)(shui)質污(wu)(wu)(wu)染(ran)等級評(ping)價(jia)標準(zhun)，分析(xi)3次采樣結果，發現3個河(he)(he)口中(zhong)青(qing)靜(jing)黃排水(shui)(shui)(shui)河(he)(he)口采樣站位(wei)中(zhong)異養細菌數均達到或接(jie)近污(wu)(wu)(wu)水(shui)(shui)(shui)區(qu)標準(zhun)，屬重污(wu)(wu)(wu)染(ran)程度(du)(du)(du)（104～105）；其次是(shi)獨流(liu)減河(he)(he)與海(hai)(hai)河(he)(he)，異養菌數平均在(zai)103～104變化，屬中(zhong)污(wu)(wu)(wu)染(ran)程度(du)(du)(du)；這(zhe)表明青(qing)靜(jing)黃排水(shui)(shui)(shui)河(he)(he)有(you)機(ji)(ji)污(wu)(wu)(wu)染(ran)最為嚴重。

2.2.2  大腸菌群(qun)

大(da)(da)(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)細菌(jun)在(zai)海(hai)水(shui)(shui)(shui)(shui)中(zhong)較(jiao)容易(yi)死(si)亡，在(zai)污(wu)濁(zhuo)少的(de)(de)(de)(de)海(hai)域(yu)檢(jian)測出很(hen)少，但(dan)在(zai)污(wu)染(ran)河(he)水(shui)(shui)(shui)(shui)流入(ru)的(de)(de)(de)(de)附(fu)近海(hai)域(yu)或(huo)在(zai)特別污(wu)染(ran)的(de)(de)(de)(de)海(hai)域(yu)數(shu)(shu)量較(jiao)多。大(da)(da)(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)是水(shui)(shui)(shui)(shui)質(zhi)糞便污(wu)染(ran)的(de)(de)(de)(de)指(zhi)示菌(jun)[10，11]，是海(hai)水(shui)(shui)(shui)(shui)陸源污(wu)染(ran)的(de)(de)(de)(de)重要生物之一。大(da)(da)(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)指(zhi)數(shu)(shu)是環(huan)境(jing)狀況評(ping)價(jia)的(de)(de)(de)(de)重要參(can)數(shu)(shu)。觀察分析3次(ci)采(cai)(cai)樣(yang)結(jie)果(guo)發(fa)現(xian)，3個河(he)口均受到大(da)(da)(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)的(de)(de)(de)(de)污(wu)染(ran)。青靜黃排水(shui)(shui)(shui)(shui)河(he)3次(ci)采(cai)(cai)樣(yang)結(jie)果(guo)變化很(hen)大(da)(da)(da)，第1次(ci)采(cai)(cai)樣(yang)結(jie)果(guo)中(zhong)其(qi)大(da)(da)(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)為23 800 CFU/mL，按國家海(hai)洋水(shui)(shui)(shui)(shui)質(zhi)評(ping)價(jia)標準規定此水(shui)(shui)(shui)(shui)質(zhi)已超過Ⅲ類標準（大(da)(da)(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)數(shu)(shu)<10 000 CFU/mL），而后(hou)2次(ci)結(jie)果(guo)中(zhong)為230 CFU/mL，變化的(de)(de)(de)(de)主(zhu)要原因在(zai)于青靜黃排水(shui)(shui)(shui)(shui)河(he)的(de)(de)(de)(de)截(jie)流。獨流減河(he)和(he)海(hai)河(he)受陸源糞便污(wu)染(ran)較(jiao)輕，但(dan)比較(jiao)2次(ci)取樣(yang)結(jie)果(guo)，海(hai)河(he)污(wu)染(ran)趨于嚴重。

2.2.3  致(zhi)病(bing)性弧菌

弧(hu)菌(jun)(jun)是自然海(hai)(hai)水中生(sheng)存的正常菌(jun)(jun)群成員之一，是目前海(hai)(hai)水養殖中最為(wei)常見的條件致病菌(jun)(jun)[12]。有(you)學者調查結(jie)(jie)果(guo)(guo)(guo)表(biao)明(ming)，弧(hu)菌(jun)(jun)喜好(hao)生(sheng)長于有(you)機(ji)質豐(feng)富(fu)(fu)的環境中，其數量(liang)的多寡可(ke)以指示有(you)機(ji)質的豐(feng)富(fu)(fu)程(cheng)度。比較3次采樣(yang)結(jie)(jie)果(guo)(guo)(guo)，3個河(he)口均檢測到了弧(hu)菌(jun)(jun)，說明(ming)3個河(he)口中都不同程(cheng)度地受(shou)到養殖海(hai)(hai)水的污染(ran)。第2次采集獨流減(jian)河(he)和海(hai)(hai)河(he)中弧(hu)菌(jun)(jun)數明(ming)顯增(zeng)加，其中海(hai)(hai)河(he)水樣(yang)中弧(hu)菌(jun)(jun)數增(zeng)加最明(ming)顯，數量(liang)級由10增(zeng)加到103；這表(biao)明(ming)獨流減(jian)河(he)和海(hai)(hai)河(he)污染(ran)程(cheng)度有(you)所增(zeng)加，海(hai)(hai)河(he)污染(ran)趨于嚴(yan)重。這與(yu)大腸菌(jun)(jun)群的評定結(jie)(jie)果(guo)(guo)(guo)相一致。

2.2.4  石油降(jiang)解(jie)菌

石(shi)油降解(jie)(jie)菌的(de)豐度在一定程度上客觀地(di)反映了海區(qu)受油類(lei)物質污染的(de)程度[13]。本次調查的(de)3個河(he)(he)口中，獨流(liu)(liu)減河(he)(he)的(de)采(cai)樣位(wei)置位(wei)于大港油田附近，而海河(he)(he)采(cai)樣點位(wei)于清淤碼頭附近，從測(ce)定結果可以(yi)看出(chu)，海河(he)(he)、獨流(liu)(liu)減河(he)(he)的(de)石(shi)油降解(jie)(jie)菌數明顯高于青(qing)靜黃排(pai)水河(he)(he)，表明2個河(he)(he)口受石(shi)油污染的(de)程度較深。

2.3  細(xi)菌指標和理化因(yin)子的相關性分析

用SPSS軟件分析了表層海水中異養菌數、大腸菌群、弧菌數、石油降解菌數和水溫、DO、COD、pH、鹽度、亞硝酸鹽、硝酸鹽、氨等理化因子的相關性，具體結果見表4。

 注：1)表示p<0.05水平下(xia)顯著相(xiang)關(guan)；2)表示p<0.01水平下(xia)非常顯著相(xiang)關(guan)；其他均為p>0.05,相(xiang)關(guan)性不明顯。

2.3.1  異(yi)養細菌

由表4可(ke)以看(kan)出，異(yi)(yi)養細(xi)菌(jun)(jun)(jun)與(yu)(yu)(yu)(yu)COD極顯著正相(xiang)關(guan)（P<0.01），相(xiang)關(guan)系(xi)數(shu)R為0.635，與(yu)(yu)(yu)(yu)DO呈顯著負(fu)相(xiang)關(guan)性(xing)（R=-0.499，P<0.05）。與(yu)(yu)(yu)(yu)各種(zhong)無機氮成負(fu)相(xiang)關(guan)，但(dan)P較大相(xiang)關(guan)性(xing)不明(ming)顯。而與(yu)(yu)(yu)(yu)其他理化因子的(de)相(xiang)關(guan)性(xing)不明(ming)顯。根據(ju)焦俊鵬等[14]對杭州(zhou)灣調查(cha)的(de)結(jie)(jie)果(guo)，異(yi)(yi)養細(xi)菌(jun)(jun)(jun)與(yu)(yu)(yu)(yu)COD呈正相(xiang)關(guan)，與(yu)(yu)(yu)(yu)無機氮呈負(fu)相(xiang)關(guan)。還有(you)黃(huang)秀清(qing)等[15]調查(cha)的(de)結(jie)(jie)果(guo)，異(yi)(yi)養細(xi)菌(jun)(jun)(jun)與(yu)(yu)(yu)(yu)DO呈負(fu)相(xiang)關(guan)，林曉(xiao)濤等[16]對山東月湖(hu)的(de)調查(cha)結(jie)(jie)果(guo)，細(xi)菌(jun)(jun)(jun)數(shu)量與(yu)(yu)(yu)(yu)DO為顯著的(de)負(fu)相(xiang)關(guan)關(guan)系(xi)。本(ben)次調查(cha)結(jie)(jie)果(guo)與(yu)(yu)(yu)(yu)以往(wang)調查(cha)結(jie)(jie)果(guo)基本(ben)相(xiang)同。

2.3.2  大腸(chang)菌群

由(you)表4可以看出，大(da)腸菌群與(yu)(yu)(yu)COD（R=0.395）正相(xiang)關(guan)，與(yu)(yu)(yu)DO顯著負相(xiang)關(guan)（P<0.05）;與(yu)(yu)(yu)鹽(yan)度(du)、NO3--N、水溫呈(cheng)負相(xiang)關(guan)，相(xiang)關(guan)系數分別為(wei)-0.427、-0.433、-0.206，可信度(du)P分別為(wei)0.077、0.073、0.412。焦(jiao)俊鵬等[14]對(dui)杭州(zhou)灣(wan)調(diao)查(cha)的結果糞大(da)腸桿(gan)菌與(yu)(yu)(yu)鹽(yan)度(du)呈(cheng)負相(xiang)關(guan)，與(yu)(yu)(yu)水溫、COD呈(cheng)正相(xiang)關(guan)。除溫度(du)之外，調(diao)查(cha)結果基(ji)本(ben)符合(he)。

2.3.3  致病性弧(hu)菌

由表(biao)4可(ke)以看(kan)出，致病性(xing)弧菌與(yu)(yu)DO、NO2--N、氨(an)氮(dan)、pH的(de)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)性(xing)為負相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)（P>0.05），與(yu)(yu)COD正(zheng)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)。許多研究(jiu)表(biao)明弧菌的(de)數量與(yu)(yu)水溫和(he)鹽度相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)，但本次(ci)調(diao)查研究(jiu)中這種相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)性(xing)并(bing)不明顯(xian)。梁(liang)玉波等[17]實驗結(jie)果(guo)表(biao)明弧菌的(de)數量與(yu)(yu)有機(ji)污染環境(jing)中氨(an)及(ji)無機(ji)氮(dan)呈顯(xian)著(zhu)的(de)正(zheng)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)、與(yu)(yu)NO2--N有明顯(xian)的(de)正(zheng)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)。這與(yu)(yu)本次(ci)的(de)調(diao)查結(jie)果(guo)不一(yi)致。

2.3.4  石(shi)油降解菌

由(you)表4可以看(kan)出，石(shi)油(you)降(jiang)解(jie)菌與(yu)COD負相(xiang)關(guan)，與(yu)NO3--N、氨氮、鹽度正相(xiang)關(guan)（P>0.05）。與(yu)鹽度的相(xiang)關(guan)性表明石(shi)油(you)污(wu)染主(zhu)要來自(zi)海洋污(wu)染。所(suo)測(ce)得(de)石(shi)油(you)降(jiang)解(jie)菌數(shu)量基本(ben)符合采樣點的地理(li)位置(zhi)特點，這充(chong)分體(ti)現了此菌的石(shi)油(you)指示作用(yong)。

3  結  論

（1）細(xi)(xi)菌(jun)指(zhi)標與理化指(zhi)標對污(wu)染指(zhi)示(shi)(shi)結(jie)果(guo)有一(yi)定的(de)(de)(de)相(xiang)似(si)性，均(jun)指(zhi)示(shi)(shi)青靜黃排水河(he)河(he)口污(wu)染較(jiao)嚴重(zhong)。2種污(wu)染評價結(jie)果(guo)基本一(yi)致。細(xi)(xi)菌(jun)作(zuo)為監(jian)測海洋(yang)環(huan)境(jing)的(de)(de)(de)指(zhi)標，直接反(fan)映(ying)環(huan)境(jing)對生物的(de)(de)(de)影(ying)響，更能反(fan)映(ying)生境(jing)的(de)(de)(de)真實狀(zhuang)況。細(xi)(xi)菌(jun)指(zhi)標對于(yu)海洋(yang)環(huan)境(jing)質量的(de)(de)(de)變化有較(jiao)好(hao)的(de)(de)(de)指(zhi)示(shi)(shi)作(zuo)用(yong)，其中的(de)(de)(de)異(yi)養菌(jun)數(shu)、大腸(chang)菌(jun)群、弧菌(jun)數(shu)、石油降解菌(jun)數(shu)可以從不同(tong)角(jiao)度指(zhi)示(shi)(shi)海洋(yang)污(wu)染的(de)(de)(de)情況，作(zuo)為海洋(yang)環(huan)境(jing)監(jian)測指(zhi)標。

（2）異(yi)養細(xi)菌(jun)與(yu)(yu)COD極顯著正(zheng)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)（P<0.01），與(yu)(yu)DO呈顯著負(fu)(fu)(fu)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)性（R=-0.499，P&lt;0.05）。大(da)腸菌(jun)群與(yu)(yu)COD（R=0.395）正(zheng)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)，與(yu)(yu)DO顯著負(fu)(fu)(fu)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)（P<0.05）；與(yu)(yu)鹽度、NO3--N、水溫呈負(fu)(fu)(fu)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)。致病性弧菌(jun)與(yu)(yu)DO、NO2--N、氨(an)氮、pH的(de)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)性為(wei)(wei)負(fu)(fu)(fu)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)（P>0.05），與(yu)(yu)COD正(zheng)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)。石油(you)降解菌(jun)與(yu)(yu)COD負(fu)(fu)(fu)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)，與(yu)(yu)NO3--N、氨(an)氮、鹽度正(zheng)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)（P>0.05）。可(ke)見，理化(hua)因(yin)子(zi)和(he)細(xi)菌(jun)指標之間(jian)具(ju)有一定的(de)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)關(guan)(guan)(guan)(guan)性。這可(ke)以(yi)進一步證明細(xi)菌(jun)作為(wei)(wei)海洋污染監測(ce)指標的(de)可(ke)信度，可(ke)以(yi)用細(xi)菌(jun)指標對海洋污染狀況作評價。但是，細(xi)菌(jun)指標也只是對海洋環境一個角度的(de)評價，還(huan)應同理化(hua)因(yin)子(zi)和(he)其(qi)他(ta)生物(wu)因(yin)子(zi)的(de)監測(ce)結(jie)果(guo)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)結(jie)合(he)，對海洋環境質(zhi)量作出(chu)較為(wei)(wei)客觀的(de)、全(quan)面(mian)的(de)和(he)準確(que)的(de)評價。

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