用發光菌評價油田采油污水綜合毒性
摘 要:本文(wen)通過發(fa)光(guang)菌(jun)發(fa)光(guang)強度(du)(du)與(yu)發(fa)光(guang)時間、發(fa)光(guang)菌(jun)發(fa)光(guang)強度(du)(du)與(yu)pH值(zhi)的(de)兩個影響(xiang)關系實(shi)驗,確 定(ding)了發(fa)光(guang)菌(jun)穩(wen)定(ding)發(fa)光(guang)時間和pH值(zhi)范圍。通過8種單(dan)因子生物(wu)毒性實(shi)驗,確定(ding)了金屬離子、非金屬離子 對發(fa)光(guang)菌(jun)的(de)半(ban)致(zhi)死濃度(du)(du)。在此基礎上,評價了某油田不達標采油污水的(de)綜合毒性以(yi)及有機化合物(wu)對生 物(wu)的(de)致(zhi)毒機理(li)。
主題詞:生物毒性 發光菌 發光強度 毒性等級
隨著生產和(he)科(ke)學(xue)技術的(de)不斷發展,人類逐(zhu)步(bu)認識(shi) 到(dao)即使(shi)化(hua)學(xue)分析非常精(jing)確,也只能測出(chu)污(wu)染物(wu)中(zhong)化(hua)合 物(wu)的(de)成分、數量,而反映(ying)不出(chu)污(wu)染物(wu)對(dui)生物(wu)體(ti)危害的(de)效 應及(ji)程(cheng)度。1992年,“北大(da)西洋公約組織高科(ke)技討論(lun) 會(hui)”提出(chu):“對(dui)于(yu)環境污(wu)染的(de)監測,僅用(yong)(yong)化(hua)學(xue)方法是(shi)沒有(you) 意(yi)義的(de),應該(gai)將化(hua)學(xue)方法和(he)生物(wu)方法兼而并用(yong)(yong)”。 生物(wu)毒(du)性法是(shi)一種快速監測分析方法。它能夠反 映(ying)各種有(you)毒(du)污(wu)染物(wu)對(dui)環境影響的(de)綜合毒(du)性,是(shi)一項綜 合性指(zhi)標。
1 材料和方法
1.1 菌 種
發光(guang)細菌凍干粉,冰箱2~5℃冷藏保存,臨用時 活化。
1.2 試 劑
NaCl、HgCl2、CdCl3、Pb(NO3)2、ZnCl2、KCN、Na2S、 K2Cr2O7、CuSO4·5H2O及FeCl3,均為(wei)分析(xi)純。
1.3 儀 器
DXY-2型生物毒性測定儀。
1.4 菌液活化
從冰(bing)箱室(2~5℃)取出(chu)發光細菌(jun)凍干粉安(an)培(pei)瓶 和2% NaCl,打開瓶頸,注入1 ml冷的2% NaCl,充分(fen) 混(hun)勻。將安(an)培(pei)瓶放入有冰(bing)塊(kuai)的1~1.5 L小保溫瓶。2 min后復蘇(su),備用。
1.5 測試方法
取6個(ge)測試管(guan),3個(ge)平行加(jia)入(ru)2 ml樣(yang)(yang)品(pin),其余3個(ge) 平行加(jia)入(ru)3%的(de)NaCl溶液(空白樣(yang)(yang)),之后(hou),在各(ge)個(ge)測試 管(guan)中加(jia)10μl復蘇發(fa)光(guang)菌(jun)液,蓋(gai)上瓶蓋(gai),顛(dian)倒5次,以充 分混合(he)均勻。拔取瓶塞,將(jiang)測試管(guan)放(fang)入(ru)生物毒性測定 儀。當發(fa)光(guang)細(xi)菌(jun)與(yu)樣(yang)(yang)品(pin)反應達(da)到穩定時間時,記錄各(ge) 測試管(guan)發(fa)光(guang)度(du)(mV),由樣(yang)(yang)品(pin)發(fa)光(guang)度(du)與(yu)空白發(fa)光(guang)度(du)計算 樣(yang)(yang)品(pin)相(xiang)對發(fa)光(guang)度(du)。
2 結果與討論
2.1 條件實驗
2.1.1 相對發光度(du)與發光時間(jian)關(guan)系
以HgCl2為基準毒性物質,選擇(ze)Hg2+濃(nong)度(du)為0.06、 0.10、0.14 mg/l,分別測(ce)(ce)(ce)定發光(guang)細菌與樣(yang)品(pin)反應5、10、 15、20、25 min的(de)相對發光(guang)度(du)。測(ce)(ce)(ce)定結果如圖1所(suo)示。 從(cong)圖1可以看出,利(li)用生物毒性測(ce)(ce)(ce)試儀測(ce)(ce)(ce)定樣(yang)品(pin) 毒性時,樣(yang)品(pin)相對發光(guang)度(du)與發光(guang)時間(jian)(jian)存在一(yi)定的(de)相互 關系。當發光(guang)細菌與樣(yang)品(pin)接(jie)觸15 min后(hou),相對發光(guang)強(qiang) 度(du)變化趨于平緩。15~20 min是最適(shi)宜的(de)測(ce)(ce)(ce)定時間(jian)(jian)。
2.1.2 相對(dui)發光度與樣(yang)品酸堿度關系
將樣(yang)品的(de)pH值(zhi)分別調節(jie)到2.0、4.0、6.0、8.0、10. 0、12.0、14.0,測定不同pH值(zhi)樣(yang)品的(de)相對(dui)發(fa)光度。測 定結果(guo)如圖(tu)2。 圖(tu)2說明,當(dang)樣(yang)品pH值(zhi)小于4或pH值(zhi)大(da)(da)于8時(shi), 相對(dui)發(fa)光度小于100%。樣(yang)品的(de)酸堿度愈(yu)強(qiang),相對(dui)發(fa) 光度降(jiang)低越顯(xian)著,樣(yang)品毒(du)性愈(yu)大(da)(da)。由此可見,pH值(zhi)對(dui) 生物(wu)毒(du)性的(de)測定結果(guo)有影響。因此,實際測定樣(yang)品生 物(wu)毒(du)性時(shi),如果(guo)考慮(lv)pH值(zhi)的(de)影響,則不需要調節(jie)pH 值(zhi),直接測定;否(fou)則,應當(dang)將pH值(zhi)調節(jie)在4~8范圍內(nei)。
………………
3 結 論
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